استفاده از روش مارتیگل و ضررهای اجتناب ناپذیر

زمینه و هدف: بازسازی قابل پیش بینی نقایص استخوان آلوئول همواره یک چالش درمانی مهم در دندانپزشکی ایمپلنت بوده است. آلوگرافت‌ها از جمله FDBA و DFDBA جایگزین‌هایی هستند که به طور گسترده مورد استفاده قرار می‌گیرند و به‌عنوان فعالیت‌های القای استخوان با درجاتی از بحث و گفتگو گزارش شده‌اند. هدف از این مطالعه تعیین تأثیر فاکتورهای رشد بر فعالیت های القای استخوانی مواد مختلف استخوانی می باشد.

مواد و روش‌ها: سلول‌های MG-63 در معرض مقادیر 60 میلی‌گرم چهار آلوگرافت استخوانی خشک شده با انجماد تجاری با یا بدون 5 نانوگرم در میلی‌لیتر دو فاکتور رشد (منفرد یا ترکیبی) قرار گرفتند. پس از 24 و 72 ساعت انکوباسیون، تأثیر مواد آزاد شده از آلوگرافت محلول در آب و فاکتورهای رشد محلول بر روی زنده‌مانی و تکثیر سلولی با استفاده از روش متیل تیازول تترازولیوم (MTT) بررسی شد. تمایز سلولی و کانی سازی به ترتیب با رونویسی معکوس کمی PCR (qRT-PCR) و رنگ آمیزی آلیزارین قرمز پس از 72 ساعت قرار گرفتن در معرض ارزیابی شد.

یافته‌ها: اثر GFهای مختلف بر روی پلیت‌های حاوی سلول/آلوگرافت تحت تأثیر نوع آلوگرافت قرار گرفت. اثرات پرولیفراتیو اولیه و دیرهنگام osseoinductive GFs در TGF-β به جای PDGF سازگارتر بود. PDGF فقط القای استخوانی محدودی را از نظر تسریع ژن‌های BSP و OC نشان داد. نتیجه‌گیری: بر اساس نتایج این مطالعه، TGF-β می‌تواند اثر القای استخوانی بیشتری بر ترکیب آلوگرافت/سلول داشته باشد و کاربرد آن در مطالعات in vitro و ترمیمی بالینی مفید باشد. کلمات کلیدی: آلوگرافت استخوان، فاکتور رشد، تمایز استئوبلاست، کانی سازی

معرفی:

از دست دادن استخوان آلوئولی یک پیامد شایع پیشرفت بیماری پریودنتال است که در نهایت می تواند منجر به تحرک دندان و سپس از دست دادن اجتناب ناپذیر دندان شود. علاوه بر این، می تواند درمان ایمپلنت بیشتر را به دلیل برخی نقص های استخوانی باقیمانده پیچیده کند (1). از آنجایی که شیوع پریودنتیت ژنرالیزه تا 15-5 درصد گزارش شده است، بازسازی قابل پیش بینی و کامل نقایص آلوئولی یک چالش درمانی مهم در دندانپزشکی ایمپلنت بوده است (2). استفاده از روش‌های مختلف مانند بازسازی بافت هدایت‌شده (GTR)، بازسازی استخوان هدایت‌شده (GBR)، و استفاده از پروتئین‌های مینای ماتریکس نمونه‌هایی برای غلبه بر این چالش هستند (3). در سال 1923، پیوند استخوان برای اولین بار توسط هدگوس برای بازسازی نقایص ناشی از ضایعات پریودنتال (4) و بعداً در سال 1965 توسط O'Leary و Nabers (5) مورد استفاده قرار گرفت. در بین هر چهار نوع مواد پیوند استخوان، آلوگرافت به نظر می‌رسد بر برخی از عوارض مربوط به استفاده از اتوگرافت، مانند درد و ناراحتی بیشتر بیمار (6)، هزینه بیشتر و محدودیت مکان‌های اهداکننده داخل دهانی (7) غلبه کند. آلوگرافت استخوانی انجمادی خشک شده دمینرالیزه (DFDBA) به مدت سه دهه با موفقیت در درمان نقایص پریودنتال، اطراف ایمپلنت و فورکاسیون استفاده شده است (8). قرار گرفتن در معرض عوامل ایجاد کننده استخوان مانند استخوان

پروتئین مورفوژنیک (BMP) بوسیله دمینرالیزاسیون اسید HCL در شرایط آزمایشگاهی در DFDBA، پتانسیل القای استخوانی خود را از طریق تسریع تمایز استئوبلاستیک/کندروبلاستیک از سلول های پیش ساز بهبود بخشیده است (9-11). گفته شده است که القای استخوانی این مواد پیوندی بسته به پروتکل آماده سازی سازنده، خواص اهداکننده و اندازه ذرات می تواند تا حد زیادی متفاوت باشد. بنابراین، به نظر می رسد که بسیاری از محصولات تجاری کنونی ممکن است فعالیت القای استخوانی محدودی داشته باشند، اگر کاملاً فاقد آن نباشند (12-15). در مطالعه قبلی ما در شرایط آزمایشگاهی (16) در مورد استئوالقایی DFDBA های مختلف (Osseo+، Alloss، Cenobone)، به این نتیجه رسیدیم که هر سه القای استخوان هستند و توانایی ترویج تمایز استخوانی سلول های SaOs-2 را دارند. از طرف دیگر، همچنین نشان داده شده است که مقدار BMPها در تقریباً همه DFDBAهای تجاری مختلف کمتر از مقداری است که می تواند واقعاً القای استخوان باشد و بنابراین لازم است BMP مکمل به آنها اضافه شود (17). فاکتور رشد مشتق شده از پلاکت-BB (PDGF-BB)، یک عامل کموتاکتیک و میتوزی قوی روی سلول های مزانشیمی، به وضوح می تواند باعث بهبودی شود. همچنین، اثر تحریکی قوی بر سنتز ماتریکس خارج سلولی (ECM) نشان داده است (18). اثر rhPDGF-BB بر رشد بافت گرانولاسیون در زخم های دیابتی نیز به خوبی تایید شده است (19). تبدیل فاکتور رشد-β (TGF-β) کموتاکسی و بقای استئوبلاست ها (20)، تشکیل استخوان نابجا را تحریک می کند و هنگامی که توسط ماتریکس ماتریژل تحویل داده می شود و در نقص های فورکاسیون کلاس II و III مولرهای فک پایین کاشته می شود، باعث ایجاد بازسازی بافت پریودنتال در پستانداران می شود. مدل (21). بنابراین، این احتمال وجود دارد که ما بتوانیم از این دو فاکتور رشد (PDGF-BB و TGF-β) برای تقویت بازسازی استخوان در محل های نقص انتخاب شده برای قرار دادن ایمپلنت بیشتر بهره مند شویم. با توجه به عدم دانش کافی و سازگاری در مورد مزایای واقعی افزودن فاکتورهای رشد (GFs) به آلوگرافت‌های استخوانی فعلی، ما این مطالعه آزمایشگاهی آزمایشگاهی را با هدف ارزیابی القای استخوانی دو FDBA تجاری (CenoNoneTM, NonDeminTM) و دو DFDBATM (CenoBone) طراحی کردیم. و OsteoDeminTM) با یا بدون فاکتورهای رشد (PDGF-BB و TGF-β) از طریق ارزیابی زنده ماندن/تکثیر سلولی (آزمایش کمی MTT)، تمایز سلولی (بیان ژن استئوژنیک از طریق کمی PCR در زمان واقعی) و کانی سازی سلولی (رنگ آمیزی قرمز با کیفیت آلیزارین).) در رده سلولی استئوبلاست انسان (MG-63).